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细胞培养 | NRK-52E(Rat renal proximal tubular epithelial cells)


大鼠肾细胞(Rat renal proximal tubular epithelial cells)NRK-52E是从大鼠肾近曲小管分离出来的具有上皮形态的细胞系,为自发永生化细胞。NRK-52E是常用的肾脏细胞模型,有助于揭示肾脏疾病(如肾纤维化、钠代谢紊乱、糖尿病等)的发展机制,以及评估药物的肾脏毒性,对开发新的治疗策略和药物安全性评价具有重要意义。





(1:3传代;第2天)




培养细节



复苏



(1)解冻:用镊子将冻存管浸于37 ℃水浴;反复摇晃,迅速完成解冻;

(2)离心:喷洒75%酒精消毒后,在无菌环境下,打开冻存瓶,用移液器将细胞连同冻存液移至含1 mL完全培养基的10 mL离心管中,室温1200 rpm离心3-5 min,细胞沉于离心管底部;

(3)培养:将上清液轻轻弃去,加2 mL完全培养基,轻柔悬起细胞,然后将所有细胞悬液移至含有3 mL完全培养基的T25培养瓶中,于37℃,5% 二氧化碳培养箱中培养;

(4)观察:每日观察细胞生长状态(培养基颜色、细胞贴壁情况、形态与密度等)并拍照。




传代



细胞密度达80%-90%开始传代

(1)清洗:无菌下吸出培养基,用37 ℃预热的PBS清洗一次;

(2)消化:加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液,转动培养瓶令其浸润所有细胞,室温(或37 ℃)消化,显微镜下观察到细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回超净台,轻敲几下培养瓶后加1 mL完全培养基终止消化;

(3)离心:用移液器轻柔吹匀后然后将悬液转移至10mL离心管中,在1200 rpm离心3-5 min;

(4)培养:无菌下弃上清液,加1 mL完全培养基悬起细胞并移至T25培养瓶中;按1:2-1:3比例添加完全培养基,用移液器轻柔吹匀后,分装至培养瓶中,于37 ℃,5% 二氧化碳培养箱中培养。




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日期:2024-06-04

细胞培养 | MCF-7(Human breast cancer cells)