常见技术FAQ
胰酶的保存条件?
​胰酶可在-20℃下保存一年。随着时间延长,胰酶的消化能力减弱。胰酶可分装冻存,在使用前从-20℃冰箱取出。尽量避免在2-8℃长期保存。 查看详情
胰酶适用于哪些细胞消化?
​胰酶适用于消化细胞间质较少的软组织和传代细胞,如胚胎、上皮、肝、肾等组织,但对纤维性组织和较硬的癌组织的效果差。其消化效果主要与pH值、温度、时间、胰酶浓度、组织块大小和硬度有关,也与细胞本身有关。不同胰酶产品中含有的组分或含量存在差异,需要参考相关资料进行使用。 查看详情
何种情况下使用不含酚红的胰酶?
​酚红可以模拟固醇类激素(特别是雌激素)的作用。为避免固醇类反应,培养细胞尤其是哺乳类细胞时,建议用不含酚红的培养基。由于酚红干扰检测,在做流式细胞检测时,也会使用不含酚红的胰酶。 查看详情
胰酶中的酚红有什么作用?
​酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。 查看详情
胰酶消化完全的标准是什么?
​一般肉眼观察贴壁细胞层,多半细胞呈沙状移动,或大部分已经脱落,就可以停止消化。 查看详情
为什么要对胰酶进行分装?如何分装储存?
​多次使用同一瓶胰酶且反复冻融,会降低消化效果并有可能造成污染,因此有必要对胰酶进行分装。胰酶分装时遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则,避免在冷冻保存时,试剂体积膨胀导致容器破损而造成污染。 查看详情
胰酶的使用浓度是多少?
​胰酶浓度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作为消化液。 查看详情
细胞传代时,血清为什么能终止胰酶消化?
​血清终止的原理是竞争抑制,就是用过量的血清中含有的蛋白与胰酶结合,不给胰酶消化细胞蛋白的机会。 查看详情
胰酶的作用机理是什么?
​胰酶是一种蛋白酶,酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基端肽键,通过在特定位置上降解蛋白,使细胞膜上和培养皿壁结合处蛋白降解,使两者分离。这时细胞在自身内部细胞骨架的张力以及培养液表面张力作用下成为球形。 查看详情
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