| 适用范围 | 试剂 |
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| 使用方法 | HEK293 细胞在略微偏酸性的环境下生长状态较好，可顺利贴壁生长，在细胞换液时，注意动作轻盈，避免细胞脱落。传代之前将培养基置于水浴锅中预热至少 30min。 细胞传代（以 T25 为例)： 1. 将细胞以 0.5×105cells/mL 接种，37℃，5%-8%的 CO2 培养 2 天后在显微镜中观察细胞密度，若细胞密度大于 80%，即可按比例或细胞密度接种（复苏后首次传代建议按 1：2 传代）；若细胞密度低于 70%，可以继续培养细胞密度至 80%以上后传代。 2. 尽量吸取干净培养瓶中的原培养基，并加入 3-5 mL PBS 溶液轻轻润洗细胞，润洗完成后去掉 PBS。 3. 在培养瓶瓶中加入 1mL 消化胰酶并铺匀至瓶底部细胞层，置于 37℃培养箱中孵育消化2 min。 4. 加入新鲜贴壁培养基终止消化，并用移液器轻轻沿瓶底吹打细胞，将悬浮细胞移至离心管中，200g，离心 5 min，弃上清。 5. 用新鲜培养基稀释细胞至 0.5×105 cells/mL，并转移至新的培养瓶中继续培养。 细胞冻存： 1. 准备细胞冻存液：取 90%终体积的新鲜培养基于离心管中，加入10%的DMSO，混合均匀；也可用商品化细胞冻存液。 2. 先将细胞按传代步骤进行消化、离心、弃上清，获得细胞沉淀。 3. 并加入适量预先制备的细胞冻存液，稀释细胞至1.0×106 cells/mL，使细胞完全重悬，将细胞分装至冻存管中。 4. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80℃冰箱过夜。 5. 将程序降温盒中的细胞转移至液氮罐中保存。 |
| 注意事项 | 1. 培养基应置于2～8℃避光保存，避免反复冻融。 2. 培养基在使用前需在 37℃水浴锅中进行预热。 3. 培养瓶在转移过程中避免剧烈摇晃。 4. 本产品使用过程中应注意无菌操作，避免污染。 5. 试剂包装如有破损或滴漏，严禁使用。 |
| 声明 | 仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。 |
| 保存条件 | 2-8℃避光保存，有效期12个月 |
