适用范围 | 试剂 |
---|---|
使用方法 | 样本冻存方法: 1. 观察类器官生长情况,当类器官活性良好,每毫升活细胞数不低于 5*105 个时,即可进行 冻存,类器官每管冻存细胞量约为 5*105 个,若细胞量较多时应注意分管冻存。 2. 小心吸走培养孔中的培养基,加入适量 TrypLE,吹散胶滴,37℃培养箱,孵育 3 min, 显微镜下观察类器官消化情况,待类器官消化至 40-60 μm 大小时,即可加入 2-3 倍消 化液体积的 DPBS-PS 终止消化,300g,离心 5 min,弃上清;加入 3mL DPBS-PS 重悬 细胞,300g,离心 5min,弃上清。 3. 加入类器官冻存液重悬沉淀,混合均匀后分装至标记好的冻存管中,每管 1mL;将冻存 管置于程序降温盒中,进行梯度降温:4℃(20 min),-20℃(2 h),-80℃(过夜), 最后转移至液氮罐。 样本复苏方法: 1. 提前准备好 37℃水浴锅。 2. 提前在超净台中取一支 15mL 离心管,加入 9mL 培养基。 3. 将冻存管从液氮罐或-80℃冰箱中取出,在水浴锅中融化大约 2 min 左右,直至剩下一小 片冰时终止。 4. 将冻存管用酒精消毒后,在超净台内打开。将样本悬液吸出加入到第 2 步准备的离心管中, 将样本悬液稀释。 5. 将 15mL 离心管离心、弃上清,用培养基重悬样本至合适的密度后接种。 |
注意事项 | 1. 本产品使用过程中应注意无菌操作,避免污染。 2. 试剂包装如有破损或滴漏,严禁使用。 4. 为保持本产品的最佳使用效果,请勿进行反复冻融; |
声明 | 仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。 |
保存条件 | 4℃保存,有效期 12 个月。 |