| 适用范围 | 试剂 |
|---|---|
| 使用方法 | 细胞传代： 1. 37℃水浴预热 293F 无血清培养基； 2. 从培养箱中取出摇瓶，取少量细胞悬液进行细胞密度及活力检测； 3. 按照密度为0.4×106/ml个细胞接种至新的摇瓶中，置于37℃、相对湿度≥80%、CO2含量为8%的培养箱中，摇床（120rpm左右）上培养。 4. 传代前，如果细胞密度低于2.0 ×106/mL，或细胞活率低于80%，将细胞悬液转移至离心管中，800 rpm~1200 rpm离心5分钟，弃掉上清，使用新鲜培养基按0.4×106/mL重悬细胞，并将细胞接种至新摇瓶。 培养基适应： 对于部分细胞株需要做培养基传代适应，当细胞活率≥95%，细胞倍增时间与对照培养基无明显差异时，认为培养基适应已经完成。 1. 当细胞在原培养基中达到≥2×106/ml(3-4天)，存活率≥90%时，以0.6×106/mL个活细胞的密度接种至含1/3 HEK293F无血清培养基和2/3原培养基的摇瓶中，置于37℃、相对湿度≥80%、CO2含量为8%的培养箱中，摇床上培养。 2. 当细胞密度达到≥3×106/ml(3-4天)，存活率≥90%时，以0.5×106/mL个活细胞密度进行传代，接种至含2/3 HEK293F无血清培养基和1/3原培养基的摇瓶中培养。 3. 当细胞密度达到≥3×106/ml(3-4天)，存活率≥90%时，以0.4×106/mL个活细胞密度进行传代，接种至含100%HEK293F无血清培养基的摇瓶中培养。 4. 继续传代2次后可用于转染操作。 蛋白瞬时表达： 1. 确保细胞在转染前处于健康状态，细胞在传代前过度生长会降低转染效率。 2. 提前按需要的密度接种细胞，以确保细胞在转染时处于合适的汇合度（根据所使用的转染试剂进行调整）。 3. 使用脂质体介导或电穿孔法进行转染，将目的基因转染到 293F细胞系中。 4. 转染完成后，Day1添加5% HEK293F补料，后续根据情况再补加一次4g/L的葡萄糖，当培养基生产超过3个月时，需额外加3mM 谷氨酰胺使用。 |
| 注意事项 | 1. 液体细胞培养基不宜长时间光照或热照，应避光保存在2～8℃。 2. 由于本培养基含有谷氨酰胺，如超过3个月建议额外补加3mM。 |
| 声明 | 仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。 |
| 保存条件 |
