| 适用范围 | 用于人羊水细胞的原代培养和绒毛取样，不具备对细胞的选择、诱导、分化功能，培养后的细胞用于核型分析和其他产前基因检测。 |
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| 使用方法 | 【适用仪器】 显微镜、二氧化碳细胞培养箱、离心机。 【样本要求】 新鲜采集的羊水细胞或绒毛膜细胞效果最佳。 【检验方法】 1. 在约1000rpm下将羊水离心10分钟以浓缩细胞。 2. 弃掉清液，加入2ml羊水细胞培养基重悬细胞。 3. 取35mm培养皿，在盖子上面及下半部侧壁都做好标记（包括编号，姓名等），培养皿中间放置专用盖玻片。 4. 滴加0.5ml细胞悬液至每块盖玻片中央，用移液管尖小心摊开（注意避免流出盖玻片外）。 5. 在37℃，5％%CO2环境条件下静置孵育，在第2天添加 1.5ml羊水细胞培养基浸没培养物。 6. 4-5天后检查培养物的生长情况，并在观察到足够的群落时收获，在收获前一天更换培养基可以获得最佳结果。 7. 终止培养：每个培养皿加3滴秋水仙胺溶液，37℃孵育30min。 8. 低渗：从培养箱中取出培养皿，轻轻倒掉培养基，然后沿培养皿的边缘轻轻加入约2ml低渗溶液，室温静置孵育30min。 9. 预固定：沿培养皿内壁缓慢加入1ml新鲜、预冷的固定液（冰醋酸：甲醇=1：3的比例配置固定液），室温下静置10min。 10. 固定：轻轻倒掉固定液，缓慢加入2ml新鲜、预冷的固定剂，室温下静置30min。 11. 再次固定：轻轻倒掉固定剂，加入2ml新鲜、预冷的固定剂，室温下静置10min（不要取出最后的固定剂）。 12. 将盖玻片从培养皿中取出，将盖玻片的边缘放在纸巾上，沥干多余的固定剂，干燥后加封片胶贴于载玻片上（细胞面朝上），注意避免盖玻片刮擦或折断等损坏。 13.室温下静置2小时，直到封片胶完全干燥，60℃烘箱中烘烤过夜。 14. 使用玻片染色的标准配方和时间对盖玻片进行染色。 1 5. 盖玻片染色并干燥后，分析中期染色体并解释结果。 【阳性判断值或者参考区间】 细胞倍增指数大于2 【检验结果的解释】 1. 固定液每次使用必须新鲜配制，否则将会形成酯类，形成背景较为明显，从而影响制片效果。 2. 细胞培养时间、加入秋水酰胺的量以及低渗操作时间等因素都会影响样品制备效果，需要根据实际样本及实验条件进行适当调整。 3. 如果标本来自于妊娠第9个月的患者，则细胞沉淀可能较大但活细胞含量较少，因此需要较大的接种密度（少于正常量的培养基）。 【检验方法的局限性】 仅用于培养羊水细胞、绒毛膜细胞。 |
| 注意事项 | 1. 羊水细胞培养基短期内可放4-8℃保存，若长期储存，应放-20℃保存，不可反复冻融。 2. 本产品只用于体外诊断，操作过程应避免污染；操作人员在检验时应做好防护，预防疾病传播。 3. 试剂包装如有破损或滴漏，严禁使用。 4. 溶液应为澄清，如有沉淀物，严禁使用。 5. 禁止使用超出规定有效期的产品。 |
| 声明 | |
| 保存条件 | 培养基应在-20℃避光储存，有效期为24个月。 |
浙江百迪生物科技有限公司（简称“百迪科技”）成立于 2019 年，公司聚集于生物细胞培养领域。2023 年新百迪全面扩容，目前是国内首家集细胞培养区域三大产品管线——细胞、细胞培养试剂、耗材于一体的全领域产品生产制造商。百迪坚持自研自产，从源头开始，重视细节，严控质量，目标成为行业领先的卓越产品生产和服务商。
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sales@biocode.cn
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