| 适用范围 | 用于外周血淋巴细胞体外增殖培养，不具备对细胞的选择、诱导、分化功能，培养后的细胞用于细胞遗传学分析及体外诊断。 |
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| 使用方法 | 【适用仪器】 显微镜、二氧化碳细胞培养箱、离心机。 【样本要求】 1. 新鲜抗凝外周血效果最佳，若样本无法立即接种，将样本放于2℃-8℃保存，并于5天内接种，超过5天将影响培养效果。 2. 不得使用已产生凝血的外周血样本。 3. 避免使用溶血、乳穈状的外周血样本。 【检验方法】 1. 接种：每5ml培养基中加入0.4-0.6ml的外周血样本，轻轻摇晃培养瓶使样本与培养基充分混合。 2. 培养：置于37℃，5% CO2培养箱中培养72小时。 3. 终止培养：向每个培养瓶中加入秋水仙素溶液，使终浓度为0.05-0.1μg/ml，轻轻摇匀后，放入培养中静置2-3小时。 4. 收获细胞：将培养液转移至离心管中，1500rpm离心10分钟。 5. 低渗：弃去上清液，加入37℃预温的0.075 mol/L的KCl低渗液8-10ml，混匀使细胞重新悬浮，37℃孵化25-35分钟。 6. 预固定：以冰醋酸：甲醇=1：3的比例配置固定液。每个离心管中加入1-2ml的固定液，充分混匀后1500rpm离心10分钟。 7. 固定：弃去上清，每个离心管中加入8ml的固定液，充分混匀后静置20-30分钟，随后1500rpm离心10分钟。 8. 再次固定：弃去上清，每个离心管中加入8ml的固定液，充分混匀后静置10分钟，随后1500rpm离心10分钟。并重复该步骤一次。 9. 制片：将固定后的细胞悬液调至合适的浓度滴于用冰水预冷的载玻片上，每张载玻片上滴2-3滴，可通过酒精灯外延5-6秒或者轻轻吹散。放入80℃烤箱中烤片2-3小时，或50℃ 过夜烤片。 10. 染色体分带：玻片从烤箱中取出，室温冷却后可进行G显带和R显带分型，吉姆萨染液染色后显微镜下观察进行染色体核型分析。 【阳性判断值或者参考区间】 细胞倍增指数大于1.5 【检验结果的解释】 1. 固定液每次使用必须新鲜配制，否则将会形成酯类，形成背景较为明显，从而影响制片效果； 2. 细胞培养时间、加入秋水仙素的量以及低渗操作时间等因素都会影响样品制备效果，需要根据实际样本及实验条件进行适当调整。 【检验方法的局限性】 仅用于培养外周血淋巴细胞。 |
| 注意事项 | 1. 外周血淋巴细胞培养基短期内可放4-8℃保存，若长期储存，应放-20℃保存，不可反复冻融。 2. 本产品只用于体外诊断，操作过程应避免污染；操作人员在检验时应做好防护，预防疾病传播。 3. 试剂包装如有破损或滴漏，严禁使用。 4. 溶液应为澄清，如有沉淀物，严禁使用。 5. 禁止使用超出规定有效期的产品。 |
| 声明 | |
| 保存条件 | 培养基应在-20℃避光储存，有效期为24个月。 |
浙江百迪生物科技有限公司（简称“百迪科技”）成立于 2019 年，公司聚集于生物细胞培养领域。2023 年新百迪全面扩容，目前是国内首家集细胞培养区域三大产品管线——细胞、细胞培养试剂、耗材于一体的全领域产品生产制造商。百迪坚持自研自产，从源头开始，重视细节，严控质量，目标成为行业领先的卓越产品生产和服务商。
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