| 来源 | 小鼠大脑皮层 |
|---|---|
| 形态 | 贴壁、内皮细胞样 |
| 传代 | 0.25%胰蛋白酶 消化2-3min 比例1∶ 2-1∶ 4 |
| 收货指南 | 1. T25细胞瓶到货后处理方案： （1） 验货：培养瓶上标签、培养瓶完好性以及瓶口是否有漏液； （2） 处置：75%酒精对培养瓶消毒后，放入37℃，5% CO2的培养箱静置培养2-4小时后，进行显微观察、拍照，作为售后维权依据； （3） 注意：贴壁细胞在运输过程中发生细胞脱落，这是正常现象，静置后可恢复贴壁。 2. 冻存管到货后处理方案： （1） 验货：包装的标签、包装内是否有干冰、冻存管完好性； （2） 处置：尽快复苏（见培养方法）或程序降温后转移至液氮中保存。 |
| 培养方法 | 1.培养基： 89% DMEM培养基；10% 胎牛血清（FBS）；1%青霉素-链霉素（P/S）。 2. 复苏： （1）解冻：用镊子将冻存管浸于37 ℃水浴；反复摇晃，迅速完成解冻； （2）离心：喷洒75%酒精消毒后，在无菌环境下，打开冻存瓶，用移液器将细胞连同冻存液移至含1 mL完全培养基的10 mL离心管中，室温1200 rpm离心3-5 min，细胞沉于离心管底部； （3）培养：将上清液轻轻弃去，加2 mL完全培养基，轻柔悬起细胞，然后将所有细胞悬液移至含有3 mL完全培养基的T25培养瓶中，于37 ℃，5% CO2培养箱中培养； （4）观察：每日观察细胞生长状态（培养基颜色、细胞贴壁情况、形态与密度等）并拍照。 3. 传代： 细胞密度达80%-90%开始传代 （1）清洗：无菌下吸出培养基，用37 ℃预热的PBS清洗一次； （2）消化：加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液，转动培养瓶令其浸润所有细胞，室温（或37 ℃）消化，显微镜下观察到细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回超净台，轻敲几下培养瓶后加1 mL完全培养基终止消化； （3）离心：用移液器轻柔吹匀后然后将悬液转移至10 mL离心管中，在1200 rpm离心3-5 min； （4）培养：无菌下弃上清液，加1 mL完全培养基悬起细胞并移至T25培养瓶中；按1∶ 2-1∶ 4比例添加完全培养基，用移液器轻柔吹匀后，分装至培养瓶中，于37 ℃，5% CO2培养箱中培养。 |
| 生物安全等级 | 1 请在无菌环境中操作，避免污染； 为了保护细胞的稳定性，细胞传代次数不宜过多； 为了结果的可靠性，实验前请确认细胞状态良好； 严格遵守生物安全操作规程。 |
| 免责声明 | 本产品仅用于科研目的，不得用于临床诊断、治疗等用途。用户应道循国家和地区的法律法规，自行承担使用本产品所产生的一切风险和责任。 请在使用前仔细阅读本说明书，并按照指导操作。如有任何疑问或需要进一步信息，请与我们联系。 |
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sales@biocode.cn
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