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蛋白酶抑制剂

产品货号A308-100
规格100ml
百迪全线产品仅供科研使用
产品信息
适用范围 适用于多种来源人间充质干细胞的生长和扩增。终止胰蛋白酶消化作用。
使用方法
1. 吸去旧培养液,将瓶内剩余的组织块去净后,根据培养瓶规格适当加入 1-5ml 重组胰酶 (产品货号:A309-500)置 37℃培养箱中消化 1-2 分钟,或室温消化 3-5 分钟,显微 镜下观察到绝大部分细胞变圆,极少量细胞贴壁仍呈纺锤形,极少量细胞已经悬浮即可 终止消化。
注意:对于人间充质干细胞,尤其是利用该体系培养的细胞而言,其消化脱壁的时间应 该较短,难以消化脱壁的细胞多数可能不是间充质干细胞,而是单核巨噬细胞等杂细胞。
2. 立即加入与胰酶替代物等体积胰酶终止液(产品货号:A308-100),用吸管吸取液体, 反复吹打培养器瓶底壁,使细胞彻底脱离瓶皿底壁。
3. 吸出培养瓶内所有液体,水平离心(250g,10 分钟),弃去上清液。
4. 用 2-3ml 间充质干细胞的完全培养液重悬细胞。
5. 以 106 个细胞接种至 T175 培养瓶中,加入 40ml 完全培养基,放置于 37℃、5%CO2 、 95% 湿度的二氧化碳培养箱中,培养 72 小时,培养期间无需换液补液。
注意:不可让间充质干细胞完全融合或过度融合,否则将会导致以下问题:
a) 细胞生长接触抑制;
b) 消化后细胞成片脱落,悬液中出现团块;
c) 干细胞自发分化。这些问题将严重影响细胞的生长状态。
6. 培养 72 小时后可收获 107 个细胞。
注意事项
1. 本产品使用过程中应注意无菌操作,避免污染。
2. 试剂包装如有破损或滴漏,严禁使用。
3. 为保持本产品的最佳使用效果,请勿进行反复冻融;
声明 仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。
保存条件
外观
浓度
有效期
产品详情
BDBIO 胰酶终止液是一种单体蛋白质,含有 181 个氨基酸残基,是由两个二硫键连接而成 的单个多肽链,是在大豆中发现的几种蛋白酶抑制剂之一,该抑制剂通过与蛋白酶活性位点 以 1:1 的摩尔比结合抑制胰蛋白酶,而对胰凝乳蛋白酶和纤溶酶抑制程度较小,也可抑制其 它丝氨酸蛋白酶。BDBIO 大无血清胰蛋白酶终止液溶液浓度为 1mg/ml,工作液用量根据胰 蛋白酶浓度确定,本产品对蛋白酶的抑制作用是可逆的,且具有 pH 依赖性,适宜的抑制胰 蛋白酶 pH 范围为 pH=
6.0-
10.0。
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