| 适用范围 | 适用于对基底膜制备要求较高的研究应用，原代小鼠哺乳上皮细胞的基因表达研究，类器官 培养等需要精准分化控制的细胞培养场景以及雌激素敏感的干细胞分化实验等。 |
|---|---|
| 使用方法 | 一、薄胶成胶方法：
1. 将基质胶置于冰上融化后，用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状。 2. 将需要使用的培养板置于冰上，加入浓度为 50μl/cm2 生长面积的基质胶。 3. 在 37℃放置 30 分钟，即可使用。 二、厚胶成胶方法： 1. 将基质胶置于冰上融化后，用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状。 2. 将需要使用的培养板置于冰浴，将培养的细胞与基质胶混合，用移液枪头使其悬浮于基质中。加入浓度为 150-200μl/cm2生长面积的基质胶。 3. 在 37℃放置 30 分钟，可成胶。可以加入细胞培养的基质，也可使细胞直接生长在胶表面。 三、薄层包被方法： 1. 将基质胶置于冰上融化后，用预冷的移液枪头混匀基质胶成匀浆状。 2. 根据使用需要，采用无血清培养基稀释基质胶。根据实验需要确定最佳包被浓度。 3. 将稀释的基质胶包被于所需的培养器皿中，包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育 1 小时。 4. 去除未结合的基质胶，用无血清培养基轻轻地冲洗。 四、类器官培养方法： 1. 用适量的 4℃过夜解冻的基质胶重悬细胞或组织沉淀，推荐重悬密度为每 50μl 基质胶悬液包含 1×105细胞，重悬后可置于冰上，重悬时间不超过 30s 以避免基质胶过早凝固。基质胶稀释比例应在 70%以上以保证培养过程中基质胶的结构稳定性。 2. 将基质胶和组织细胞的混合悬液点入预热的 24 孔板底部正中央，每孔 30μl 左右，避免悬液接触孔板侧壁。为防止基质胶室温凝固，此步骤应尽快完成。 3. 将接种完成后的培养板至于 37℃二氧化碳恒温培养箱中，孵育 15min 左右待基质胶凝固。 4. 待基质胶完全凝固后，沿壁缓慢加入类器官培养基，24 孔板每孔 500μl，避免破坏已凝固结构。 5. 将 24 孔板置于 37℃二氧化碳培养箱中培养。 6. 每 3 天更换一次培养基，更换培养基时应避免破坏基质胶。 五、胚胎干细胞 ES 和诱导多能干细胞iPS 培养： 1. 在冰上融化基质胶。 2. 在 50 ml 离心管中加入 24 ml 的预冷的 DMEM/F-12，并且放在冰上。 3. 将解融的基质胶按一定稀释比例（如 1:100）加入到预冷的 DMEM/F-12 中（在 50 ml 离心管中），混匀。 4. 稀释好的基质胶溶液必须立即使用，进行培养皿的包被。 5. 轻轻晃动培养皿，将基质胶溶液均匀的覆盖到培养皿的表面。 注意：如果培养皿的表面没有被基质胶溶液完全覆盖，则不能用于人 ES 和 iPS 细胞培养。 6. 培养皿使用前至少在室温(15-25℃)孵育 1 个小时，不可使基质胶蒸发。 注意：如果不是立即使用，包被好的培养皿必须密封防止基质胶溶液的蒸发，包被后可以在 2-8°C 放置一周。在使用之前，至少在室温（15-25℃)中放置 30 分钟恢复到室温。 7. 轻轻的将培养皿的一侧倾斜，使多余的基质胶溶液在一侧的边缘汇聚。通过移液器或者泵吸取多余的基质胶溶液。确保包被的表面没有被刮到。 8. 加入 ES 或 iPS 细胞置于 37℃二氧化碳培养箱中培养。 |
| 注意事项 | 1. 收到产品并确认到货情况无异常后，请将基质胶储存于-80℃冰箱，短暂使用可置于-20℃ 冰箱。切勿将基质胶储存于自动除霜的冰箱中。在第一次融化后请分装保存，应避免基质胶反复冻融。 2. 因基质胶在 10℃以上即可成胶，在操作过程中，保持基质胶一直置于冰上，所有接触的细胞培养器皿，移液吸头，分装管等都必须预冷后使用。 3. 所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用 70％乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证基质胶呈匀浆状。 |
| 声明 | 仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。 |
| 保存条件 | -20℃至-80℃避光保存，有效期两年。 |
浙江百迪生物科技有限公司（简称“百迪科技”）成立于 2019 年，公司聚集于生物细胞培养领域。2023 年新百迪全面扩容，目前是国内首家集细胞培养区域三大产品管线——细胞、细胞培养试剂、耗材于一体的全领域产品生产制造商。百迪坚持自研自产，从源头开始，重视细节，严控质量，目标成为行业领先的卓越产品生产和服务商。
了解百迪动态，掌握最新科技资讯。如果您对我们的产品和服务感兴趣，或者希望了 解更多信息，请随时联系我们的客户服务团队。 我们期待与您合作，一同推动科研的辉煌未来。
400-601-2023
sales@biocode.cn
400-601-2023
sales@biocode.cn
